血液DNA提取試劑盒實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備及注意事項(xiàng)說(shuō)明
瀏覽次數(shù)：3085發(fā)布日期：2021-01-22
血液是與所有器官都有接觸的組織，蘊(yùn)藏著大量寶貴信息。早前人們開(kāi)發(fā)了血液活檢技術(shù)。用來(lái)分析循環(huán)腫瘤DNA、檢測(cè)血液中完整的腫瘤細(xì)胞和收集由腫瘤細(xì)胞釋放出的外泌體。還可以分析血液樣本中的腫瘤DNA，并對(duì)癌癥的基因特點(diǎn)進(jìn)行檢測(cè)。隨著基因測(cè)序技術(shù)的快速發(fā)展，血液活檢技術(shù)以其迅速、便捷、損傷性小等優(yōu)點(diǎn)已經(jīng)逐步應(yīng)用于臨床。用來(lái)監(jiān)測(cè)腫瘤的術(shù)后反應(yīng)，預(yù)測(cè)腫瘤復(fù)發(fā)。還能夠協(xié)助醫(yī)生發(fā)現(xiàn)患者的無(wú)任何癥狀的早期腫瘤。
血液DNA提取試劑盒可從新鮮或冷凍的抗凝血中提取人類的或哺乳動(dòng)物的基因組DNA。整個(gè)提取過(guò)程不涉及酚等試劑，提取的血液基因組片段大，純度高，質(zhì)量穩(wěn)定可靠，配合高通量的全自動(dòng)核酸提取儀，可實(shí)現(xiàn)DNA的自動(dòng)化提取。
血液DNA提取試劑盒在操作的時(shí)候，無(wú)需加熱，室溫(15-25℃)下即可進(jìn)行全程操作，提取結(jié)果可用于各種常規(guī)操作，包括酶切、PCR、熒光定量PCR、文庫(kù)構(gòu)建、Southern雜交，芯片檢測(cè)、高通量測(cè)序等實(shí)驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備及重要注意事項(xiàng)：
1、向蛋白酶K中加入用量(0.3ml/1.25ml)的蛋白酶K儲(chǔ)存液使其溶解，-20℃保存。配制好的蛋白酶K勿長(zhǎng)時(shí)間室溫放置，避免反復(fù)凍融，以免影響其活性。
2、所有離心操作均在室溫下完成。
3、血液樣品反復(fù)凍融，會(huì)導(dǎo)致提取的DNA的片段較小且提取量下降。所得基因組DNA也應(yīng)盡可能避免反復(fù)凍融，以免降解。如果提取冷凍血液的基因組DNA，建議37℃水浴，迅速解凍后再進(jìn)行后續(xù)操作。
4、血液樣品的儲(chǔ)存：
1)短期保存：已加入抗凝劑的血液樣品可在2～8℃儲(chǔ)存到10天，對(duì)于某些實(shí)驗(yàn)例如Southern雜交等，需要得到完整全長(zhǎng)的基因組DNA，請(qǐng)將血液樣品在2～8℃儲(chǔ)存不超過(guò)3天，此時(shí)基因組DNA的降解程度較輕。
2)長(zhǎng)期保存：已加入抗凝劑的血液請(qǐng)置于-70℃保存(如果提取的是高分子量的DNA，推薦使用EDTA作為抗凝劑)。
