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Thermo NE-PER™ 細胞核和細胞質(zhì)提取試劑

Thermo Scientific NE-PER 細胞核和細胞質(zhì)提取試劑盒可在不到兩小時內(nèi)高效裂解細胞并提取單獨的細胞質(zhì)和細胞核蛋白組分。

NE-PER 細胞核和細胞質(zhì)提取試劑盒的特點：

•快速 — 可在不到兩小時內(nèi)獲得細胞核和細胞質(zhì)組分
•經(jīng)驗證 — NE-PER 試劑盒已在超過950種zhi名出版物中引用
•通用 – 來自培養(yǎng)細胞或組織的細胞核蛋白（僅適用于新鮮樣品）
•可擴展 — 具有兩種試劑盒規(guī)格，用于從細胞和組織中生成提取物
•便利 — 指示簡單，無需梯度超速離心
•可兼容 — 可用于下游測定，包括 Western 免疫印跡、凝膠遷移率測定、蛋白測定、報告基因測定和酶活性測定

NE-PER 試劑盒是一種核蛋白提取方法，涉及簡單、逐步裂解細胞并離心分離細胞核和細胞質(zhì)蛋白組分。只需要使用臺式微量離心機、試管和移液器工具。NE-PER 試劑可將各種細胞質(zhì)和細胞核蛋白高效溶解并分離為小份，使基因組 DNA 和 mRNA 的交叉污染或干擾極少。脫鹽或稀釋后，分離的蛋白可用于進行免疫檢測以及蛋白相互作用實驗，如遷移率變動分析 (EMSA)、免疫共沉淀 (Co-IP) 和沉淀分析。

有多種方法可用于分離細胞核并制備細胞核蛋白提取物。大多數(shù)制備細胞核提取物的方法都是繁瑣的流程，需要可能影響細胞核蛋白完整性的機械均質(zhì)化、凍/融循環(huán)、廣泛的離心或透析步驟。NE-PER 細胞核和細胞質(zhì)提取試劑盒是一種基于試劑的方案，可逐步裂解細胞、從完整的細胞核中分離細胞質(zhì)，然后從基因組 DNA 和 mRNA 中提取出細胞核蛋白。在使用培養(yǎng)細胞時，這一溫和的流程只需不到兩小時并且只需要一臺標(biāo)準(zhǔn)的臺式離心機。此外，可以從同一細胞培養(yǎng)或組織樣品中回收活性細胞核蛋白和細胞質(zhì)蛋白。

該試劑盒通常可從200萬個細胞中產(chǎn)生 200-500 µg 細胞質(zhì)蛋白和 100-200 µg 細胞核蛋白（濃度為 1 mg/mL）。細胞溶質(zhì)和細胞核部分間的典型交叉污染率為大約 10%。該方法主要從細胞核中回收可溶性蛋白，而不是在染色質(zhì)中結(jié)合的蛋白或細胞核包膜的整合膜蛋白。細胞核提取物的蛋白濃度可通過在提取中采用不同體積的細胞核提取試劑 (NER) 很容易的進行控制，提取效率不會有任何重大損失。從細胞中特定提取各種細胞核蛋白對于很多基因調(diào)控研究的成功非常重要。盡管有多種方法可用于分離細胞核并制備細胞核蛋白提取物，但這些方法的大多數(shù)都很繁瑣，需要采用可能影響很多脆弱細胞核蛋白完整性的機械均質(zhì)化、凍/融循環(huán)、廣泛的離心或透析步驟。NE-PER 試劑盒克服了這些問題，可為 EMSA 和其他分析技術(shù)提供高質(zhì)量、濃縮的細胞核蛋白提取物。

Thermo NE-PER™ 細胞核和細胞質(zhì)提取試劑